Comment créer de la gélose?
Bien qu'il ne faille pas beaucoup de temps pour créer de la gélose, votre simple poudre de gélose ou votre mélange fait maison contient tous les nutriments dont les microbes ont besoin pour se développer.
Que vous meniez vos propres expériences scientifiques à la maison ou que vous souhaitiez économiser un peu d'argent dans votre laboratoire, commencez à mélanger votre propre milieu gélosé. La gélose est un matériau semblable à un gel fabriqué à partir d'algues ou de protéines animales et vous pouvez l'utiliser pour développer des bactéries pour vos expériences. Bien qu'il ne faille pas beaucoup de temps pour créer de la gélose, votre simple poudre de gélose ou votre mélange fait maison contient tous les nutriments dont les microbes ont besoin pour se développer. Une fois que vous avez fabriqué l'un ou l'autre type de milieu gélosé, versez-le dans des boîtes de Pétri avec vos échantillons et faites pousser des germes!
Gélose nutritive de base
- 2,5 cuillères à café (4,6 g) de poudre d'agar
- 3 ⁄ 4 tasses (180 ml) plus 11 ⁄ 2 cuillères à soupe (22 ml) d'eau distillée
Essuyez-le autour de l'embouchure du bécher pour empêcher les bactéries d'entrer en contact avec le milieu gélosé.
Donne assez de médium pour 10 boîtes de Pétri
Gélose maison
- 1 cube de bouillon de boeuf
- 2 cuillères à café (8 g) de sucre
- 1 tasse (240 ml) d'eau distillée
- 1 sachet (2,5 cuillères à café ou 7 g) de gélatine non aromatisée
Une fois que vous avez fabriqué l'un ou l'autre type de milieu gélosé, versez-le dans des boîtes de Pétri avec vos échantillons et faites pousser des germes!
Donne assez de médium pour 6 boîtes de Pétri
Partie 1 sur 2: fabrication et stérilisation d'un milieu gélosé
- 1Chauffer un bécher et des boîtes de Pétri au four à 177°C pendant 2 à 3 heures. Pour stériliser votre équipement, couvrez le dessus d'un bécher de laboratoire de 1000 ml (34 fl oz) avec du papier d'aluminium. Vous devrez également mettre du papier d'aluminium sur 6 à 10 boîtes de Pétri en verre. Mettez tout votre équipement dans un four froid puis allumez-le à 177°C. Chauffez le matériel pendant 2 à 3 heures et laissez-le refroidir complètement avant de continuer à faire la gélose.
- Si vous n'avez pas de boîtes de Pétri, utilisez des pots en verre pour bébé dont les étiquettes ont été retirées. Couvrez-les de papier d'aluminium et stérilisez-les au four avec le bécher.
- 2Verser les ingrédients moyens dans le bécher. Une fois le bécher refroidi, posez-le sur votre plan de travail. Pour gagner du temps, utilisez de la poudre de gélose nutritive, qui convient à tout type d'expérience que vous faites. Versez 3 ⁄ 4 tasses (180 ml) plus 11 ⁄ 2 cuillères à soupe (22 ml) d'eau distillée dans le bécher avec 2,5 cuillères à café (4,6 g) de poudre d'agar. Si vous voulez faire un support maison en utilisant des articles de garde-manger, mettez plutôt ces ingrédients dans le bécher:
- 1 cube de bouillon de boeuf
- 2 cuillères à café (8 g) de sucre
- 1 tasse (240 ml) d'eau distillée
- 1 sachet (2,5 cuillères à café ou 7 g) de gélatine non aromatisée
Le saviez-vous: bien que vous puissiez utiliser le milieu fait maison pour de nombreuses expériences, cela peut ne pas fonctionner si les bactéries de votre expérience mangent des protéines. C'est parce que la gélatine dans le milieu fait maison contient des protéines, donc le milieu peut se liquéfier.
- 3Porter le mélange à ébullition sur une plaque chauffante pendant 1 minute. Si vous avez une plaque chauffante scientifique, tournez-la au maximum et placez le bécher dessus. Portez des gants résistant à la chaleur et remuez très soigneusement le bécher pour combiner le mélange. Faites-le bouillir pendant 1 minute en faisant tourner le bécher.
- Si vous n'avez pas de plaque chauffante, mettez le bécher dans le micro-ondes et faites-le chauffer par incréments de 10 secondes jusqu'à ce que le mélange bout.
- Assurez-vous que la poudre d'agar ou le mélange de bouillon se dissout complètement.
- 4Refroidir le milieu gélosé à 49°C. Éteindre le feu et laisser refroidir le milieu gélosé pendant quelques minutes. Ensuite, insérez un thermomètre pour voir s'il est refroidi à 49°C avant de le verser dans les boîtes de Pétri.
- Si vous n'avez pas de thermomètre pour vérifier la température, attendez environ 10 à 15 minutes avant d'utiliser le milieu.
Astuce: essayez d'utiliser un milieu gélosé fait maison plus rapidement que le milieu fait de poudre d'agar car les ingrédients peuvent se décomposer plus rapidement.
Partie 2 sur 2: verser des plaques de gélose
- 1Désinfectez votre espace de travail avec de l'alcool isopropylique ou de l'eau de Javel diluée. Trempez un chiffon propre dans de l'alcool isopropylique ou un mélange d'eau de Javel dilué et essuyez-le sur votre surface de travail pour éliminer les bactéries. Pour diluer l'eau de Javel, mélangez 1 partie d'eau de Javel avec 4 parties d'eau.
- Passez une minute à vous laver les mains après avoir désinfecté votre espace.
- 2Étiquetez le fond de chaque boîte de Pétri avec des informations sur l'expérience. Placez les boîtes de Pétri sur votre plan de travail afin qu'elles soient à l'envers. Prenez un marqueur et étiquetez chaque plat avec les informations dont vous avez besoin pour l'expérience.
- Par exemple, vous pourriez écrire les bactéries, la date et vos initiales.
- 3Retournez les boîtes de Pétri et essuyez la bouche du bécher avec une lingette imbibée d'alcool. Retournez les boîtes de Pétri stérilisées sur votre plan de travail propre et retirez une lingette imbibée d'alcool de son emballage. Essuyez-le autour de l'embouchure du bécher pour empêcher les bactéries d'entrer en contact avec le milieu gélosé.
- 4Verser 1 ⁄ 4 po (0,64 cm) de milieu dans chaque plat et mettre les couvercles. Verser lentement pour ne pas introduire de bulles d'air dans le milieu. Dès que vous avez recouvert le fond de la boîte de Pétri avec 1 ⁄ 4 pouces (0,64 cm) de milieu, mettez le couvercle pour éviter la contamination.
- Répétez cette opération pour chaque boîte de Pétri que vous avez.
- 5Laisser reposer les plats pendant environ 30 minutes pour que la gélose fige. Ne déplacez pas les boîtes de Pétri immédiatement après les avoir remplies car elles ont besoin de temps pour se gélifier. Vérifiez les plats après environ 30 minutes pour voir si la gélose est opaque et rigide.
- 6Retournez les plats et conservez-les au réfrigérateur. Il est important de conserver les boîtes de Pétri à l'envers afin que la condensation ne s'égoutte pas sur la gélose. Le milieu gélosé se conserve au réfrigérateur jusqu'à 2 ans.
Astuce: essayez d'utiliser un milieu gélosé fait maison plus rapidement que le milieu fait de poudre d'agar car les ingrédients peuvent se décomposer plus rapidement.
- Achetez des bouillons qui ne contiennent ni conservateurs ni arômes. Ceux-ci peuvent rendre plus difficile la croissance de votre milieu et il peut être plus difficile de voir la croissance si votre bouillon a des taches d'assaisonnements.
- Si vous n'avez pas de bécher de laboratoire, mettez les ingrédients moyens dans une casserole. Chauffer le mélange sur la cuisinière à feu moyen-élevé tout en le remuant constamment.
- Soyez toujours prudent et portez des gants de cuisine lorsque vous manipulez des matériaux chauds.
- Bécher de laboratoire de 1000 ml (34 fl oz)
- des boîtes de Pétri
- Feuille d'aluminium
- Tasses ou pichets à mesurer
- Cuillères à mesurer
- Mitaines de four ou gants résistants à la chaleur
- Plaque chauffante scientifique
- Thermomètre
- Alcool isopropylique ou eau de Javel
- Chiffon
- Lingette alcoolisée
- Casserole, facultatif
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