Comment préparer un tampon phosphate de Sorensen?
Vous pouvez créer un tampon simple en mélangeant des quantités exactes de phosphate de sodium dibasique et de phosphate de potassium, ou en utilisant une combinaison de phosphate de sodium dibasique et de phosphate de sodium monobasique.
Les tampons sont une partie importante de la plupart des expériences de laboratoire, car ils aident à maintenir les mélanges entre un pH de 5,0 et 8,2. Un tampon phosphate de Sorensen est une option non toxique pour vos projets et ne contient aucune substance nocive, contrairement à un tampon cacodylate. Ce type de tampon n'est pas difficile à fabriquer, bien que vous ayez besoin d'une formation en chimie et de quelques fournitures de laboratoire de base pour faire le travail. Vous pouvez créer un tampon simple en mélangeant des quantités exactes de phosphate de sodium dibasique et de phosphate de potassium, ou en utilisant une combinaison de phosphate de sodium dibasique et de phosphate de sodium monobasique.
Méthode 1 sur 2: faire un tampon avec du phosphate de potassium
- 1Versez 2 L (8,5 c) d'eau distillée dans 2 grands récipients réutilisables. Vérifiez que vous utilisez exactement 1 L (4,2 c) pour votre tampon. Utilisez toujours de l'eau distillée au lieu du robinet afin que le pH soit aussi précis que possible.
- Vous pouvez trouver de l'eau distillée dans la plupart des magasins vendant des fournitures de laboratoire.
- Chaque récipient doit contenir 1 L (4,2 c) d'eau distillée.
- 2Mélanger 35,76 g de na₂hpo₄ dans 1 récipient d'eau. Mélanger la poudre jusqu'à ce qu'elle soit complètement dissoute dans l'eau. Étiquetez-le comme du phosphate de sodium dibasique, afin de ne pas mélanger les ingrédients de votre tampon.
- 3Ajouter 9,08 g de phosphate de potassium monobasique dans l'autre récipient. Incorporer l'ingrédient jusqu'à ce qu'il soit complètement mélangé avec l'eau distillée. Assurez-vous également d'étiqueter ce récipient afin de pouvoir distinguer vos ingrédients.
Fermez le haut de votre contenant de tampon phosphate et étiquetez-le avec la date du jour. - 4Ajouter 71,5 ml (0,302 c) de na₂hpo₄ dans un récipient vide. Disposez un grand récipient en verre réutilisable sur votre espace de travail, puis versez une grande quantité de phosphate de sodium dibasique. Mesurez exactement 71,5 ml (0,302 c) dans le récipient pour que le mélange soit exact.
- Le récipient doit pouvoir contenir au moins 1 L (4,2 c) de liquide.
- 5Mélanger 28,5 ml (0,120 c) de kh₂po₄ avec le na₂hpo₄. Incorporer une petite quantité de phosphate de potassium dans le récipient. Vérifiez que vous ajoutez exactement 28,5 ml (0,120 c) au mélange, afin que le pH du tampon soit aussi précis que possible.
- Le rapport doit être exact, sinon votre tampon peut ne pas avoir le bon pH.
- 6Vérifiez le ph pour voir si c'est 7,2. Prenez un testeur de pH et collez-le dans le mélange. Regardez l'électrode de test pour voir si le pH est de 7,2 ou s'il est supérieur ou inférieur. Si le pH n'est pas exact, vous devrez peut-être créer un nouveau mélange en utilisant des rapports plus exacts de phosphate de sodium dibasique et de phosphate de potassium.
- Vous pouvez obtenir une électrode de test de pH dans la plupart des endroits qui vendent des fournitures de laboratoire.
Rapports de ph alternatifs
5,0 ph: 1 mL (0,0042 c) de NA₂HPO₄ et 99 mL (0,42 c) de KH₂PO₄
6,0 ph: 12 mL (0,051 c) de Na₂HPO₄ et 88 mL (0,37 c) de KH₂PO₄
8,0 ph: 94,5 mL (0,399 c) de Na₂HPO₄ et 5,5 mL (0,023 c) de KH₂PO₄
- 7Conservez votre mélange pendant 2-3 semaines à 4°C. Scellez le haut de votre contenant de tampon phosphate et étiquetez-le avec la date du jour. Conservez-le dans un endroit frais pour le garder en sécurité et utilisez-le chaque fois que vous avez besoin de neutraliser un mélange. Après quelques semaines, jetez le tampon et fabriquez-en un nouveau, car les tampons phosphates peuvent être un terrain fertile pour les petits organismes au fil du temps.
Si le pH n'est pas exact, vous devrez peut-être créer un nouveau mélange en utilisant des rapports plus exacts de phosphate de sodium dibasique et de phosphate de potassium.
Méthode 2 sur 2: travailler avec uniquement du phosphate de sodium
- 1Incorporer 35,61 g de na₂hpo₄ dans 1 L (4,2 c) d'eau distillée. Verser une grande quantité d'eau distillée dans un récipient vide et réutilisable et incorporer la poudre mesurée. Attendez que l'ingrédient se dissolve complètement, puis étiquetez le récipient.
- 2Mélanger 27,6 g de nah₂po₄ dans 1 L (4,2 c) d'eau distillée. Mesurez la poudre dans l'eau distillée et mélangez les deux ingrédients ensemble. Étiquetez le récipient afin de pouvoir distinguer tous les ingrédients de votre tampon.
- 3Préparez une solution basique avec une grande quantité de na₂hpo₄. Pensez à ce que vous voudriez que le pH de votre tampon phosphate soit. Vous pouvez rendre votre mélange aussi acide que 5,8 ou aussi basique que 8,0, selon le rapport de votre tampon. Versez 47,35 mL (0,2001 c) de Na₂HPO₄ dans un récipient séparé et pour rendre votre tampon plus basique, et une plus petite quantité pour le rendre acide.
- Par exemple, un tampon avec 47,35 ml (0,2001 c) de Na₂HPO₄ donnerait un tampon avec un pH de 8,0, tandis que 4 ml (0,017 c) vous donneraient un pH de 5,8.
- 4Ajouter une petite quantité de nah₂po₄. Verser 2,65 mL (0,0112 c) de NaH₂PO₄ dans le récipient avec le Na₂HPO₄ liquide. Bien mélanger les deux ingrédients pour finir de faire le tampon.
- Par exemple, 46 mL (0,19 c) de NaH₂PO₄ et 4 mL (0,017 c) de Na₂HPO₄ vous donnent un tampon avec un pH de 5,8, tandis que 2,65 mL (0,0112 c) de NaH₂PO₄ et 47,35 mL (0,2001 c) de Na₂HPO₄ vous donne un pH de 8,0.
- Pour quelque chose de plus neutre, comme 7,2, mélangez ensemble 36 ml (0,15 c) de Na₂HPO₄ avec 14 ml (0,059 c) de NaH₂PO₄.
Un tampon phosphate de Sorensen est une option non toxique pour vos projets et ne contient aucune substance nocive, contrairement à un tampon cacodylate. - 5Diluer le tampon avec 50 ml (0,21 c) d'eau bidistillée. Versez une grande quantité d'eau purifiée dans votre mélange pour aider à diluer le tampon et le rendre plus efficace. En règle générale, le tampon et l'eau diluée doivent être dans un rapport de 1:1.
- 6Étiquetez et conservez votre tampon dilué à 4°C. Fermez le haut de votre contenant réutilisable et étiquetez-le comme tampon phosphate. Gardez le mélange dans un endroit très frais pendant 2-3 semaines, en utilisant le tampon au besoin. Faites un nouveau lot après quelques semaines, car les tampons phosphates ont tendance à favoriser une croissance indésirable.
- Vous pouvez acheter un tampon au phosphate de Sorensen préfabriqué auprès d'entreprises qui vendent des fournitures de laboratoire.
- Ce n'est pas une bonne idée de faire vos propres tampons et mélanges à moins d'avoir une bonne formation en chimie.
Faire un tampon avec du phosphate de potassium
- Phosphate dibasique de sodium (Na₂HPO₄)
- Phosphate de potassium (KH₂PO₄)
- 3 conteneurs
- testeur de pH
Travailler uniquement avec du phosphate de sodium
- Phosphate dibasique de sodium (Na₂HPO₄)
- Phosphate de sodium monobasique (NaH₂PO₄)
- Eau bidistillée
- 3 conteneurs
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