Comment faire pousser des bactéries dans une boîte de Pétri?
Si vous voulez faire pousser des bactéries dans une boîte de Pétri, préparez une gélose en mélangeant 0,5 cuillère à café de poudre d'agar avec 0,25 tasse d'eau. Placez le mélange au micro-ondes pendant 1 minute jusqu'à ce que l'eau bout, puis laissez-le refroidir à température ambiante avant de verser le mélange dans le plat. Placez le plat au réfrigérateur jusqu'à ce que vous en ayez besoin, puis introduisez les bactéries en frottant un coton-tige ou en versant du liquide sur la gélose. Ensuite, utilisez un morceau de ruban adhésif pour étiqueter et sceller le plat, et placez-le dans un endroit sombre et chaud pendant 4 à 6 jours pour faire croître les bactéries. Pour des conseils sur la façon d'enregistrer vos résultats et de vous débarrasser de la vaisselle, lisez la suite!
Si vous voulez faire pousser des bactéries dans une boîte de Pétri, préparez une gélose en mélangeant 0,5 cuillère à café de poudre d'agar avec 0,25 tasse d'eau.
Vous avez toujours voulu faire pousser des bactéries pour un projet scientifique ou juste pour le plaisir? C'est étonnamment simple! Tout ce dont vous avez besoin est de la gélose nutritive (une matière gélatineuse spéciale pour la culture), un certain nombre de boîtes de Pétri stérilisées et de bonnes sources de bactéries dégoûtantes!
Partie 1 sur 3: préparer les boîtes de Pétri
- 1Préparez la gélose. La gélose est la substance gélatineuse utilisée pour la culture des bactéries. Il est fabriqué à partir d'un type d'algue rouge, qui offre une surface de croissance idéale pour de nombreux types de bactéries. Certains types de gélose contiennent des nutriments ajoutés (comme le sang de mouton) qui aident à favoriser une croissance bactérienne plus vigoureuse.
- Le type de gélose le plus simple à utiliser dans cette expérience est une gélose nutritive qui se présente sous forme de poudre. Vous aurez besoin d'autant d'agar que vous en avez besoin, mais n'utilisez pas moins de 1,2 gramme (0,5 cuillère à café) de poudre d'agar pour chaque boîte de Pétri de 10 centimètres (3,9 pouces) que vous souhaitez utiliser.
- Dans un plat ou un bol résistant à la chaleur, mélanger 1,2 grammes (0,5 cuillère à café) de la poudre de gélose nutritive dans 60 millilitres (0,25 c) d'eau chaude. Multipliez ces quantités par le nombre de boîtes de Pétri que vous prévoyez d'utiliser.
- Placez le bol ou le plat au micro-ondes et laissez-le bouillir pendant 1 minute ou plus, en veillant à ce que la solution d'agar ne déborde pas.
- Lorsque la solution est prête, la poudre d'agar doit être complètement dissoute et le liquide doit être de couleur claire.
- Laissez la solution de gélose refroidir pendant plusieurs minutes avant de continuer. Vous ne voulez pas vous brûler!
- 2Préparez les boîtes de Pétri. Les boîtes de Pétri sont de petits récipients à fond plat en verre transparent ou en plastique. Ils ont deux moitiés - une partie supérieure et une partie inférieure - qui s'emboîtent l'une dans l'autre. Cela protège le contenu de tout air contaminé indésirable, mais permet également aux gaz produits par les bactéries de s'échapper.
- Les boîtes de Pétri doivent être complètement stérilisées avant d'être utilisées pour la culture de bactéries, sinon les résultats de l'expérience pourraient être affectés. Les boîtes de Pétri nouvellement achetées doivent être pré-stérilisées et scellées dans un emballage en plastique.
- Sortez la boîte de Pétri de son emballage et séparez les deux moitiés. Très soigneusement, versez la solution de gélose chaude dans la moitié inférieure de la boîte de Pétri - juste assez pour former une couche sur le fond de la boîte. Travaillez en présence d'une bougie à haute flamme ou d'un bec Bunsen pour réduire la contamination.
- Remplacez rapidement la moitié supérieure de la boîte de Pétri pour empêcher toute bactérie en suspension dans l'air de contaminer l'expérience. Mettez les boîtes de Pétri de côté pendant 30 minutes à 2 heures, jusqu'à ce que la solution de gélose refroidisse et durcisse (quand elle sera prête, elle ressemblera à du Jell-O).
- 3Réfrigérer les boîtes de Pétri jusqu'au moment de les utiliser. Si vous ne prévoyez pas d'utiliser immédiatement les boîtes de Pétri remplies de gélose, elles doivent être conservées au réfrigérateur jusqu'à ce que vous soyez prêt à procéder à l'expérience.
- Conserver les boîtes de Pétri au réfrigérateur empêche l'eau à l'intérieur des boîtes de s'évaporer (les bactéries ont besoin d'un environnement humide pour se développer). Il permet également à la surface de la gélose de durcir légèrement, ce qui évite toute déchirure ou gougeage lors du transfert de vos échantillons de bactéries.
- Lors du stockage des boîtes de Pétri au réfrigérateur, les boîtes doivent être placées à l'envers. Cela aide à empêcher toute condensation sur le couvercle de tomber et de perturber la surface de croissance.
- Les boîtes de Pétri remplies de gélose se conservent au réfrigérateur pendant quelques mois. Lorsque vous êtes prêt à les utiliser, sortez-les du réfrigérateur et laissez-les atteindre la température ambiante avant d'introduire vos échantillons.
Ouvrez la boîte de Pétri et versez soigneusement une petite quantité d'eau de Javel sur les colonies de bactéries, en tenant la boîte au-dessus d'un évier.
Partie 2 sur 3: bactéries en croissance
- 1Introduire des bactéries dans les boîtes de Pétri. Une fois que la solution de gélose a durci et que les boîtes de Pétri sont à température ambiante, vous êtes prêt pour la partie amusante - introduire les bactéries. Il existe plusieurs méthodes pour le faire - par contact direct ou par prélèvement d'échantillons.
- Contact direct: c'est le moment où les bactéries sont transférées dans la boîte de Pétri par contact direct, c'est-à-dire en touchant la gélose. L'une des façons les plus courantes de procéder consiste simplement à appuyer légèrement le bout de votre doigt (avant ou après vous être lavé les mains) sur la surface de la gélose. Cependant, vous pouvez également essayer d'enfoncer un ongle ou la surface d'une vieille pièce de monnaie dans la gélose, ou même placer un petit cheveu ou une goutte de lait dans le plat. Utilisez un coton-tige stérile si vous en avez un. Utilise ton imagination!
- Prélèvement d'échantillons: Avec cette méthode, vous pouvez collecter des bactéries sur presque toutes les surfaces et les transférer dans la boîte de Pétri, tout ce dont vous avez besoin sont des cotons-tiges propres. Prenez simplement un coton-tige et passez-le sur n'importe quelle surface à laquelle vous pouvez penser - l'intérieur de votre bouche, une poignée de porte, les touches de votre clavier d'ordinateur ou les boutons de votre télécommande - puis utilisez-le pour rayer la surface de la gélose (sans le déchirer). Ces endroits abritent beaucoup de bactéries et devraient fournir des résultats intéressants (et dégoûtants) dans quelques jours.
- Si vous le souhaitez, vous pouvez placer plusieurs échantillons de bactéries dans chaque boîte de Pétri - tout ce que vous avez à faire est de diviser la boîte en quadrants (quartiers) et de glisser un échantillon différent de bactéries dans chacun d'eux.
- Il est recommandé de conserver un quadrant de la boîte de Pétri exempt d'échantillon de bactéries à utiliser comme groupe témoin. Cela permet de savoir si la gélose a été contaminée avant l'introduction des échantillons bactériens.
- 2Étiquetez et scellez les boîtes de Pétri. Une fois que vous avez introduit les bactéries, vous devez remettre le couvercle sur la boîte de Pétri et le sceller avec du parafilm ou du Saran.
- Assurez-vous d'étiqueter chaque boîte de Pétri avec la source de la bactérie qu'elle contient, sinon vous ne pourrez pas dire laquelle est laquelle. Vous pouvez le faire en utilisant du ruban adhésif et un marqueur.
- Par mesure de précaution supplémentaire, vous pouvez placer chaque boîte de Pétri dans un sac à fermeture à glissière. Cela fournira une couche supplémentaire de protection contre les colonies de bactéries dangereuses qui pourraient se développer, mais vous permettra toujours de voir le contenu de la boîte de Pétri.
- 3Placez les boîtes de Pétri dans un endroit sombre et chaud. Laissez les boîtes de Pétri dans un endroit sombre et chaud où les bactéries peuvent se développer, sans être dérangées, pendant plusieurs jours. N'oubliez pas de ranger la vaisselle à l'envers afin que la croissance bactérienne ne soit pas perturbée par les gouttelettes d'eau.
- La température idéale pour la croissance des bactéries se situe entre 70 et 37°C (20-37°C). Si nécessaire, vous pouvez placer les boîtes de Pétri dans un endroit plus frais, mais les bactéries se développeront beaucoup plus lentement.
- Laissez les bactéries se développer pendant 4 à 6 jours, car cela donnera aux cultures suffisamment de temps pour se développer. Une fois que les bactéries commencent à se développer, vous remarquerez peut-être une odeur provenant de la vaisselle.
- 4Enregistrez vos résultats. Après quelques jours, vous remarquerez une incroyable variété de bactéries, de moisissures et de champignons qui se développent à l'intérieur de chaque boîte de Pétri.
- Utilisez un cahier pour noter vos observations sur le contenu de chaque plat et peut-être tirer une conclusion sur les endroits qui contenaient le plus de bactéries.
- C'était l'intérieur de ta bouche? La poignée de porte? Les boutons de votre télécommande? Les résultats pourraient vous étonner!
- Si vous le souhaitez, vous pouvez mesurer la croissance quotidienne des colonies de bactéries en utilisant un feutre pour tracer un cercle autour de chaque colonie au fond de la boîte de Pétri. Après plusieurs jours, vous devriez avoir une collection d'anneaux concentriques au fond de chaque plat. Cela vous aidera à compter et à enregistrer les données.
- 5Testez l'efficacité des agents antibactériens. Une variante intéressante de cette expérience consiste à introduire un agent antibactérien (désinfectant pour les mains, savon, etc.) dans la boîte de Pétri afin de tester son efficacité.
- Une fois que vous avez introduit des bactéries dans la boîte de Pétri, utilisez un coton-tige pour placer une petite goutte de gel désinfectant pour les mains, de savon désinfectant ou d'eau de Javel au centre de l'échantillon de bactéries, puis continuez l'expérience normalement.
- Au fur et à mesure que les bactéries dans le plat se développent, vous devriez voir un anneau ou un "halo" autour de l'endroit où vous avez placé l'agent antibactérien, là où aucune bactérie ne se développe. C'est ce qu'on appelle la "zone d'élimination" (ou plus précisément, la "zone d'inhibition").
- Vous pouvez mesurer l'efficacité de différents agents antibactériens en comparant la taille des zones de destruction dans chaque boîte de Pétri. Plus la zone de destruction est large, plus l'agent antibactérien est efficace.
Ne mettez jamais rien dans la boîte qui soit susceptible de se développer en bactéries dangereuses (les fluides corporels ne doivent jamais être placés sur une boîte de Pétri).
Partie 3 sur 3: éliminer en toute sécurité les bactéries
- 1Prenez les mesures de sécurité appropriées. Avant d'essayer de vous débarrasser de vos boîtes de Pétri, vous devez d'abord prendre les mesures de sécurité appropriées.
- Bien que la plupart des bactéries que vous cultivez ne soient pas dangereuses, les grandes colonies de bactéries peuvent poser plus de risques - vous devrez donc les tuer avant de les jeter à l'aide d'eau de Javel.
- Protégez vos mains de l'eau de Javel en portant des gants en caoutchouc, protégez vos yeux avec des lunettes en plastique et protégez vos vêtements en portant un tablier.
- Couvrez les coupures ouvertes avec des gants en caoutchouc et évitez d'ingérer ou de respirer les bactéries pendant leur croissance.
- 2Versez de l'eau de Javel dans les boîtes de Pétri. Ouvrez la boîte de Pétri et versez soigneusement une petite quantité d'eau de Javel sur les colonies de bactéries, en tenant la boîte au-dessus d'un évier. Cela détruira les bactéries.
- Faites très attention à ne pas laisser l'eau de Javel toucher votre peau, car elle brûlerait.
- Placez ensuite la boîte de Pétri désinfectée dans un sac en plastique ziplock et jetez le sac à la poubelle.
Conserver les boîtes de Pétri au réfrigérateur empêche l'eau à l'intérieur des boîtes de s'évaporer (les bactéries ont besoin d'un environnement humide pour se développer).
- Essayez d'utiliser une gélose dextrose de pomme de terre comme milieu de croissance. Préparez un milieu de dextrose de pomme de terre en faisant bouillir une pomme de terre de 20 grammes (0,71 oz), 4 g (2 c. à thé) d'agar et 2 g (1 c. à thé) de dextrose dans un bécher. Mettez cette solution dans une boîte de Pétri et laissez sécher. Prenez des cotons-tiges stériles et frottez-les sur n'importe quel endroit (télécommande, poignée de porte, conduite d'eau, etc.). Fermez la boîte de Pétri à l'aide d'une pellicule plastique. Laisser incuber 24 heures dans un endroit chaud. Le lendemain, vérifiez la boîte de Pétri. Vous devriez pouvoir voir des colonies de bactéries.
- Les boîtes de Pétri ne sont pas réutilisables. Lorsqu'elles sont laissées sans surveillance, les bactéries se multiplient de manière incontrôlable.
- Ne mettez jamais rien dans la boîte qui soit susceptible de se développer en bactéries dangereuses (les fluides corporels ne doivent jamais être placés sur une boîte de Pétri). Si le plat est rouvert, cela pourrait causer une maladie grave.
- La gélose fondue est très chaude et colle à votre peau, ce qui signifie qu'elle pourrait vous causer de graves brûlures si vous la touchez.
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Questions et réponses
- Où ou comment obtenez-vous de la gélose nutritive? Ou avez-vous besoin d'utiliser de la gélose pour ce projet?Pour faire pousser des bactéries dans un environnement de laboratoire, vous avez besoin d'agar. Vous pouvez le trouver en ligne ou dans un magasin de fournitures scientifiques.
- Comment identifier les bactéries dans une boîte de Pétri?Les bactéries forment normalement des colonies et peuvent être vues dans de petites bulles lisses opposées aux champignons qui sont souvent d'apparence floue et duveteuse.
- Comment mesurer la taille des colonies?Certains plats ont une grille au fond que vous pouvez utiliser pour mesurer les colonies. Si votre plat n'en a pas, mesurez l'extrémité de votre coton-tige et utilisez-la pour obtenir une estimation approximative.
- Pourquoi faut-il stériliser les boîtes de Pétri et la gélose?Pour qu'ils ne soient pas compromis par des bactéries étrangères ou indésirables. Vous voulez avoir une culture de bactéries pures.
- Peut-on réutiliser les boîtes de Pétri?S'il est généralement recommandé d'utiliser des plats frais pour chaque expérience, il est possible de réutiliser des plats si nécessaire. Les méthodes de stérilisation varieront en fonction du matériau de votre plat (verre vs plastique). Si vos boîtes de Pétri en plastique ont été utilisées pour récolter des agents pathogènes vivants, il est recommandé d'utiliser une nouvelle boîte car le risque de contamination croisée est élevé.
- Comment transformer une gélose utilisée pour la gelée en une gélose capable de cultiver des bactéries?La gélose est bonne, tant que vous ajoutez un agent protéique, comme le sang. Cela le rendra approprié pour la croissance bactérienne.
- Comment savoir s'il est adulte?Théoriquement, tant qu'il y a suffisamment de gélose et d'humidité, la bactérie est capable de se diviser indéfiniment.
- J'ai entendu dire que vous aviez besoin d'un incubateur pour faire pousser des bactéries. Est-ce sécuritaire de le faire à la maison?Les bactéries sont capables de se développer à température ambiante, qui est d'environ 20 degrés Celsius. Par conséquent, bien que l'utilisation d'un incubateur soit recommandée, elle n'est pas obligatoire. En ce qui concerne les problèmes de sécurité, tant que vous ne prélevez pas d'échantillons dans des endroits comme les salles de bain qui peuvent contenir des bactéries pathogènes, et si vous vous débarrassez correctement des bactéries cultivées à la fin de l'expérience, cela devrait être relativement sûr à faire à la maison.
- Comment compter les colonies bactériennes?Vous les compteriez manuellement. Les colonies bactériennes sont de grands amas de micro-organismes que l'on peut voir sans l'aide d'un microscope. Les grappes vues seront le nombre de colonies bactériennes.
- Comment puis-je trouver l'effet du lavage des mains sur la croissance microbienne?À l'aide de deux ensembles de boîtes de Pétri, créez un groupe d'échantillons de bactéries prélevés avant de vous laver les mains et un groupe prélevé après vous être lavé les mains. Comparez la croissance des bactéries entre les groupes au fil du temps.
Les commentaires (29)
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